Determination of acute median lethal concentration and sublethal effects on AChE activity of Gymnotus carapo (Teleostei: Gymnotidae) exposed to trichlorfon / Determinação da concentração letal média e efeitos subletais da atividade AchE de Gymnotus carapo (Teleostei: Gymnotidae) exposto ao triclorfon

Trichlorfon (TRF) is a pesticide widely used in aquaculture to control fish ectoparasites. This pesticide is an inhibitor of acetylcholinesterase, an essential enzyme for termination of nerve impulses. High rates of TRF use generate risks to the environment and human health. In the environment, pesticides can affect the local fauna and generate an ecological breakdown. There are several studies performed with fish production; however, gaps are created for native fish with other commercial values. The tuvira (Gymnotus carapo) is a fish native to Brazilian fauna and has great commercial importance in sport fishing. The present study aimed to determine the lethal concentration of trichlorfon (Masoten) in Gymnotus carapo and its sublethal effects on the enzyme AChE. In this study, the acute toxicity (the concentrations to kill 50% of the fish LC50) of TRF in tuviras (Gymnotus carapo) and acetylcholinesterase inhibition in liver and muscle tissue of tuviras submitted to sublethal concentrations were evaluated. For the acute assay, concentrations of 0.0, 5.0, 7.5, 15, 22.5, 30, 37.5 and 45 mg L-1 were used for a period of 96 h. After the acute exposure period, a LC50 of 6.38 mg L-1 was determined. In the sublethal assay, concentrations of 0.0, 0.238, 0.438 and 0.638 mg L-1 were used, based on 10% of the LC50, over a period of 14 days. Two collections were performed: one at seven days and the other at the end (day 14). Inhibition of acetylcholinesterase in the liver was only shown (p < 0.05) for the treatment with 0.638 mg L-1 after 14 days of exposure. At seven days, muscle activity showed a significant difference only for the treatments 0.438 and 0.638 mg L-1, compared with the treatment 0.238 mg L-1 and control. At 14 days of exposure, only the treatment 0.638 mg L-1 showed significant differences in relation to the other groups, thus showing that enzyme recovery had occurred. The value found in the acute test allowed the conclusion that TRF presents moderately toxic characteristics to Gymnotus carapo. The toxicity parameter values calculated in the present study assisted in estimation of maximum allowable limits in bodies of water when combined with test data from other non-target organisms.(AU)

O triclorfon (TRC) é um pesticida muito utilizado na aquicultura para o controle de ectoparasitos de peixes. Este pesticida é um inibidor da acetilcolinesterase, uma enzima essencial para a finalização de impulsos nervosos. As altas concentrações utilizadas de TRC geram riscos ao meio ambiente e à saúde humana. No ambiente, os pesticidas podem afetar a fauna local e gerar um colapso ecológico. Existem vários estudos com peixes de produção, no entanto, há lacunas para peixes nativos com outros valores comerciais. A tuvira (Gymnotus carapo) é um peixe nativo da fauna brasileira e possui grande importância comercial na pesca esportiva. O presente trabalho, delineado para determinar a concentração letal de triclorfon (Masoten) em Gymnotus carapo e seus efeitos subletais na enzima AChE, avaliou a toxicidade aguda (concentrações para matar 50% dos peixes CL50) do TRC em tuviras (Gymnotus carapo) e a inibição da acetilcolinesterase no fígado e tecido muscular de tuviras. Para o ensaio agudo, foram utilizadas concentrações de 0,0, 5,0, 7,5, 15, 22,5, 30, 37,5 e 45 mg L-1por um período de 96 horas. Após o período de exposição aguda, foi determinado uma CL50 de 6,38 mg L-1. No ensaio subletal, foram utilizadas concentrações de 0,0, 0,238, 0,438 e 0,638 mg L-1, com base em 10% do CL50, durante um período de catorze dias. Foram realizadas duas colheitas: uma aos sete dias e a outra ao final (décimo quarto dia). A inibição da acetilcolinesterase no fígado foi demonstrada apenas (p <0,05) para o tratamento com 0,638 mg L-1 após catorze dias de exposição. Aos sete dias, a atividade muscular mostrou diferença significativa apenas para os tratamentos 0,438 e 0,638 mg L-1, em comparação com o tratamento 0,238 mg L-1 e controle. Aos catorze dias de exposição, apenas o tratamento 0,638 mg L-1 apresentou diferenças significativas em relação aos demais grupos, demonstrando a recuperação enzimática. O valor encontrado no teste agudo permitiu concluir que o TRC apresenta características moderadamente tóxicas para Gymnotus carapo. Os valores dos parâmetros de toxicidade calculados no presente estudo permitiram o estabelecimento da estimativa dos limites máximos permitidos em corpos d'água quando combinados com dados de testes de outros organismos não-alvo.(AU)

Parasitological assessment in hybrids Serrasalmidae fish farmed in Brazil / Avaliação parasitológica em híbridos de peixes Serrasalmidae cultivados no Brasil

Abstract This study evaluated the parasitic fauna of hybrids tambacu (Colossoma macropomum × Piaractus mesopotamicus) and patinga (P. mesopotamicus × Piaractus brachypomus) and their host-parasite-environment interaction during the warm and cold seasons in two fish farms located in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil, South America. A total of 120 fish, being 60 fish for species (30 in the warm season and 30 in the cold season) were examined. Water quality was measured weekly to evaluate the interaction between environmental conditions and parasitism. Fifteen species of parasites were found: Ichthyophthirius multifiliis, Chilodonella hexasticha e Trichodina sp. (Protozoa), Henneguya piaractus, Myxobolus colossomatis and Myxobolus cuneus (Myxozoa); Anacanthorus penilabiatus, Mymarothecium boegeri, Mymarothecium viatorum, and Notozothecium janauachensis (Monogenoidea), Goezia spinulosa and Goezia sp. (Nematoda), Echinorhynchus jucundus (Acanthocephala), and Dolops carvalhoi, Lernaea cyprinacea (Crustacea). The ciliate protozoan I. multifiliis and monogenoids were the most prevalent parasites in the cold and warm seasons for both hybrids in the different culture systems intensive production and sportive fishing. It was observed that the serrasalmid hybrids are more susceptible to parasites and harbor high diversity of parasites in relation to the parental species C. macropomum, P. mesopotamicus and P. brachypomus, with a predominance of ectoparasites.

Resumo Este estudo avaliou a fauna parasitária de híbridos tambacu (Colossoma macropomum × Piaractus mesopotamicus) e patinga (P. mesopotamicus × Piaractus brachypomus) e a interação hospedeiro-parasito-ambiente durante as estações quente e fria em duas pisciculturas localizadas no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil, América do Sul. Foram examinados um total de 120 peixes, sendo 60 peixes por espécie. A qualidade da água foi mensurada semanalmente para avaliar a interação entre condições ambientais e parasitismo. Foram encontradas quinze espécies de parasitos: Ichthyophthirius multifiliis, Chilodonella hexasticha e Trichodina sp. (Protozoa); Henneguya piaractus, Myxobolus colossomatis e Myxobolus cuneus (Myxozoa), Anacanthorus penilabiatus, Mymarothecium boegeri, Mymarothecium viatorum e Notozothecium janauachensis (Monogenoidea), Goezia spinulosa e Goezia sp. (Nematoda), Echinorhynchus jucundus (Acanthocephala), Dolops carvalhoi eLernaea cyprinacea (Crustacea). O protozoário ciliado I. multifiliis e helmintos monogenoides foram os parasitos mais prevalentes nas estações fria e quente para ambos os híbridos nos diferentes sistemas de cultivo, produção intensiva comercial e pesca esportiva. Observou-se que os híbridos de serrasalmídeos são mais suscetíveis aos parasitos e abrigam alta diversidade parasitária em relação às espécies parentais, C. macropomum, P. mesopotamicus e P. brachypomus em ambiente de cultivo com predominância de ectoparasitos.

Histopathology from liver of tuvira ( Gymnotus spp.) parasitized by larvae of nematodes / Histopatologia de fígado de tuvira parasitado por larvas de nematoides

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the histological changes in the liver of thirty-five Gymnotusspp. parasitized by endohelminths collected between April 2012 to October 2013 in commercial bait fish farming of Pantanal basin. Histological cuts of 7µm were stained with hematoxylin-eosin for parasites research and liver changes and have also been submitted to the Perls histochemical method for evaluation of hemosiderosis (Fe+++) based on the incidence degree and severity of change (Grade I, II and III) and tests for the presence of central melanomacrophages. Parasites identified were: Brevimulticaecumsp. with a prevalence of 22,9%, Eustrongylidessp 17,1%, Contracaecumtype I 68,7%, Contracaecumtype II 5,7%, Contracaecumtype III 5,7% and larvae of Anisakidae11,4%. Histological analysis showed intense disorganization of hepatic parenchyma with degenerate hepatocytes due to high parasitic infection, changes that can be deleterious and compromise the organism functioning, being harmful to the health of evaluated animals. Also evidencing normal tissue interleaved with different stages of Fe+++ deposit in grades II and III, injuring or destroing the cell. Histopathological changes in the tuvira's liver suggested a chronic response and the development of a balance relation between tuvira and parasitism by endohelminth identified in this study. There are also a testimony to the health condition of commercial bait fish farming on current ecosystem conditions.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações histológicas do fígado de trinta e cinco Gymnotusspp. parasitados por endohelmintos, coletados entre abril de 2012 a outubro de 2013, em isqueiros da bacia do Pantanal. Cortes histológicos de 7µm foram corados com hematoxilina-eosina para pesquisa de parasitos e de alterações hepáticas; também foram submetidos ao método histoquímico de Perls para avaliação de hemossiderose (Fe+++) com base no grau de incidência e severidade da alteração (Grau I, II e III) e pesquisa da presença de centro de melanomacrófagos. Os parasitos identificados foram: Brevimulticaecumsp., com prevalência de 22,9%, Eustrongylidessp. 17,1%, Contracaecumtipo I 68,7%, Contracaecumtipo II 5,7%, Contracaecumtipo III 5,7% e larvas de Anisakidae11,4%. A análise histológica revelou intensa desorganização do parênquima hepático, com hepatócitos degenerados devido à alta infecção parasitária. Essas alterações podem ser deletérias e comprometer o funcionamento do organismo, sendo prejudicial à saúde dos animais avaliados; também evidenciou tecido normal intercalado com estágios diferenciados de depósito de Fe+++ nos Graus II e III, podendo lesionar ou destruir a célula. As alterações histopatológicas do fígado das tuviras sugerem uma resposta crônica e o desenvolvimento de uma relação de equilíbrio entre a tuvira e o parasitismo pelos endohelmintos identificados neste estudo. Elas também são um testemunho da condição de saúde dos peixes dos isqueiros nas condições atuais do ecossistema.

Parasitological assessment in the hybrid surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans), with uncommon occurrence of Monogenea parasites / Avaliação parasitológica no híbrido surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans), com ocorrência incomum de parasitos Monogenea

Abstract This study evaluated the parasite fauna of farmed hybrid surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) and the host-parasite-environment relationship in two fish farms located in Mato Grosso do Sul, Central Brazil, South America. A total of 120 hybrids from two different farms, 60 in each season (30 in the hot and 30 in cold season) were examined during a year. Water quality was weekly measured to evaluate the interaction among environmental conditions and parasitism. Histopathology was used to observe the effects of the parasites and environment on the fish gills. The ciliate protozoan Ichthyophthirius multifiliis and the monogeneans (Ameloblastella sp., Amphocleithrium paraguayensis, Vancleaveus ciccinus, V. fungulus and V. janacauensis) were the most prevalent parasites detected in both seasons in both farms, with prevalence above 80%. It was stated that parasites did not cause important damage in the health status of the hybrid surubim. These results might be related to general good management practices and environmental quality implemented by the fish farmers. The presence of uncommon monogenean parasites to this hybrid compared to their parents causing an environmental and ecological concern is here discussed.

Resumo Este estudo avaliou a fauna de parasitos do surubim híbrido cultivado (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) e a relação hospedeiro-parasito-ambiente em duas pisciculturas localizadas no Estado do Mato Grosso do Sul, região Centro-Oeste, Brasil. Um total de 120 híbridos de duas fazendas, 60 em cada estação (30 na estação quente e 30 na fria), foram examinados durante um ano. A qualidade da água foi medida semanalmente para avaliar a interação entre as condições ambientais e o parasitismo. Histopatologia foi usada para observar os efeitos dos parasitos e do ambiente nas brânquias dos peixes. O protozoário ciliado Ichthyophthirius multifiliis e Monogenea (Ameloblastella sp., Amphocleithrium paraguayensis, Vancleaveus ciccinus, V. fungulus e V. janacauensis) foram os parasitos mais prevalentes detectados em ambas estações nas duas fazendas, com prevalências acima de 80%. Observou-se que os parasitos não causaram danos ao estado de saúde do surubim híbrido. Esses resultados estão relacionados às boas práticas de manejo e qualidade ambiental implementada pelos produtores. É discutida a presença incomum de Monogenea para esse híbrido, comparado com seus progenitores, podendo causar preocupação ambiental e ecológica.

Haematological Parameters of the Hybrid Surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) farmed in Brazil

This study evaluated the haematological parameters of the hybrid surubim (Pseudoplatystoma corruscans x P. reticulatum) farmed in intensive and semi intensive system. A total of 240 fish were examined, 120 from fish farm and 120 from a semi-intensive for comparison between the hot and cold season. The water quality was weekly measured to evaluate the influence of environmental conditions on the haematology. Fish from intensive system showed hematocrit and white blood cell count (WBC) higher in hot season while the total plasmatic protein, hemoglobin concentration, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and mean corpuscular volume (MCV) were higher in cold season. In fish from semi intensive system, the red blood cells count (RBC) and total thrombocyte number was higher in hot season while the MCHC and MCV were higher in cold season. There was no alterations in the numbers of lymphocytes, neutrophils, basophils, eosinophils and PAS - positive granular leukocyte (PAS-LG). The results showed the influence of seasonality on the hematological parameters of the hybrid surubim kept under normal farming conditions. Regarding water quality, hot season was directly related to increased water temperature and decreased dissolved oxygen while the opposite was found in cold season.

Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): new parasite records for two freshwater fish species farmed in Brazil / Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): novo registro de parasito para duas espécies de peixes de água doce cultivadas no Brasil

Family Trichodinidae comprises ciliate protozoa distributed worldwide; they are considered some of the main parasitological agents infecting cultivated fish. However, the trichodinidae parasitizing important fish species cultured in Brazil are unknown, and more taxonomic studies on this group of parasites are required. This research morphologically characterizes Trichodina colisae Asmat & Sultana, (2005) of pacu (Piaractus mesopotamicus) and patinga hybrid (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivated in the central and southeast regions of the country. Fresh assemblies were made from mucus scraped from the skin, fins and gills, fixed with methanol and, subsequently, impregnated with silver nitrate and stained with Giemsa for assessment under light microscopy. This research reports not only the second occurrence of T. colisae in the world, but also its first occurrence in South America.(AU)

Tricodinídeos são protozoários ciliados móveis com ampla distribuição mundial; são considerados um dos agentes parasitários que mais acometem peixes cultivados. No Brasil, a maioria dos tricodinídeos que parasitam importantes espécies de peixes cultivados são desconhecidos, o que requer mais estudos taxonômicos com esse grupo de parasitos. Este estudo caracteriza morfologicamente Trichodina colisae Asmat & Sultana, 2005 de pacu (Piaractus mesopotamicus) e do híbrido patinga (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivados, respectivamente, no Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Foram feitas montagens a fresco do raspado de muco da pele, nadadeiras e brânquias, fixados com metanol e, posteriormente, impregnados com nitrato de prata e coradas com Giemsa para avaliação em microscopia óptica. O presente estudo relata não só a segunda ocorrência de T. colisae no mundo, mas também a primeira ocorrência na América do Sul.(AU)

Heparina e K3EDTA como anticoagulantes para tambaqui (Colossoma macropomum Cuvier, 1816) / Heparin and K3EDTA as anticoagulants for tambaqui (Colossoma macropomum Cuvier, 1816)

Este estudo avaliou a eficácia da heparina sódica e do EDTA tripotássico como anticoagulantes e seus efeitos sobre os parâmetros hematológicos de tambaqui (Colossoma macropomum). Foram utilizados dez indivíduos de tambaqui com médias de 384,9 ± 85,71 g de peso e 27,90 ± 2,10 cm de comprimento total para avaliação da heparina 5.000 UI e 100 UI, bem como do K3EDTA 10 por cento. Foram analisados a inibição da coagulação por 10 h, eritrograma e teste de fragilidade osmótica dos eritrócitos. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P < 0,05). Heparina 5000 UI, heparina 100 UI e K3EDTA 10 por cento foram eficazes na prevenção da coagulação por mais de 10 h, no entanto o EDTA tripotássico causou hemólise desde os primeiros momentos. No eritrograma não foi observada diferença (P > 0,05) na contagem de eritrócitos, hematócrito, taxa de hemoglobina e CHCM, no entanto, houve aumento do VCM (P < 0,05) nas amostras acondicionados com K3EDTA 10 por cento. Este anticoagulante causou incremento (P < 0,01) na fragilidade osmótica dos eritrócitos quando comparado com a heparina pura, heparina diluída, e grupo controle. A utilização da heparina como anticoagulante é mais apropriada para tambaqui (Colossoma macropomum), visto que foi eficiente na prevenção da coagulação por mais de 10 h, sem ocasionar hemólise, ou alterações nos parâmetros hematológicos e na fragilidade osmótica dos eritrócitos.

The efficacy of sodium heparin and tripotassium EDTA as anticoagulant and their effect on the hematological parameters of tambaqui (Colossoma macropomum) were evaluated in this study. Ten fish weighing 384.9 ± 85.71 g and measuring 27.90 ± 2.10 cm were used for heparin 5.000 IU, heparin 100 IU and K3EDTA 10 percent evaluation. Clotting inhibition after 10 h, erythrogram and osmotic fragility of erythrocytes were observed. The results were submitted to variance analysis and means compared by Tukey test (P < 0.05). Heparin 5.000 IU, heparin 100 IU and K3EDTA 10 percent were effective in preventing coagulation for more than 10 h. However, tripotassium EDTA caused hemolysis since first moments. In erythrogram there was no difference (P > 0.05) in erythrocyte count, hematocrit, hemoglobin and MCHC. On the other hand, an increase in MCV (P < 0.05) in samples kept with K3EDTA10 percent was observed. This anticoagulant provoked a significant increase (P < 0.01) in the osmotic fragility of erythrocytes when compared to pure heparin, diluted heparin and the control group. Heparin as an anticoagulant is more appropriate for tambaqui since it was effective in preventing coagulation for more than 10 h, without causing hemolysis, changes on hematological parameters or osmotic fragility of erythrocytes.

First record of Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida) in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) in the Pantanal wetland, Mato Grosso do Sul State, Brazil / Primeiro registro de Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida) em tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) no Pantanal, Mato Grosso do Sul, Brasil

The blood infection by Trypanosoma sp. in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) from the Pantanal wetland was reported in this study. Ten fish from the Paraguay River in the Pantanal were evaluated for the presence of hemoflagellates. Trypomastigotes of Trypanosoma sp. were observed in blood smears from three fish (30 percent prevalence) and some forms were seen to be undergoing division. Using the diagnostic methods of fresh examination and blood centrifugation in hematocrit capillary tubes, the prevalence rate was 80 percent. This is the first report of Trypanosoma sp. in tuvira in Brazil.

O objetivo do presente estudo foi reportar a infecção por Trypanosoma sp. em tuviras (Gymnotus aff. inaequilabiatus) oriundas do Pantanal Sul-mato-grossense, Brasil. Dez peixes provenientes do rio Paraguai, Pantanal Sul-mato-grossense, foram avaliados quanto à presença de hemoflagelados. Tripomastigotas de Trypanosoma sp. foram observados nas extensões sanguíneas de três peixes (30 por cento de prevalência), e algumas formas encontravam-se em divisão. Por meio do exame a fresco e da centrifugação do sangue em capilar de hematócrito como métodos para diagnóstico, a taxa de prevalência foi de 80 por cento. Esse é o primeiro relato de Trypanosoma sp. em tuviras no Brasil.

Heparina e Na2EDTA como anticoagulantes para surubim híbrido (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans): eficácia e alterações hematológicas / Heparin and Na2EDTA as anticoagulants for hybrid surubim catfish (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans): efficacy and hematological changes

Este estudo avaliou o efeito da heparina 100UI e do Na2EDTA nas concentrações de 3, 5 e 10 por cento sobre a coagulação sanguínea e os parâmetros hematológicos de surubim híbrido. Foram utilizados 10 peixes, com peso médio de 386,7±24,3g e comprimento total médio de 38,7±6,4cm, para colheita das amostras sanguíneas e determinação do percentual do hematócrito, teor de proteínas plasmáticas totais e teste de fragilidade osmótica dos eritrócitos (FOE). Os dados foram submetidos à análise de variância, e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey, a 5 por cento de probabilidade. A coagulação foi eficientemente inibida quando utilizado o Na2EDTA; já as amostras com heparina coagularam 10 horas após a coleta. Houve aumento na fragilidade osmótica dos eritrócitos (P<0,01), especialmente quando utilizado o Na2EDTA 10 e 5 por cento, não havendo diferença entre o controle e a heparina. No hematócrito e teor de proteínas plasmáticas totais, não foram verificadas diferenças significativas. O Na2EDTA 3 por cento é seguro e eficiente como anticoagulante para surubim híbrido, prevenindo a coagulação por mais de 10h e ocasionando discreto efeito sobre a fragilidade osmótica dos eritrócitos.

The effect of heparin 100IU and Na2EDTA in concentration of 3 percent, 5 percent and 10 percent on the blood coagulation and hematological parameters of hybrid surubim catfish were evaluated. We used ten fish weighing 386,7±24,3g and average length of 38,7±6,4cm for collection of blood samples and determination of the percentage of hematocrit, plasma total protein content and osmotic fragility erythrocytes test (OFE). Data were submitted to analysis of variance and averages compared by Tukey test at 5 percent probability. Coagulation was efficiently inhibited when used the Na2EDTA, while the samples with heparin coagulate ten hours after collection. There was an increase in osmotic fragility of erythrocytes (P<0.01), especially when using Na2EDTA 10 percent and 5 percent, with no difference between control and heparin. In hematocrit and total plasma protein content were not observed statistical differences. The Na2EDTA 3 percent is safe and effective anticoagulant for hybrid surubim catfish, preventing clotting for more than 10 hours causing slight effect on the osmotic fragility of erythrocytes.

Distúrbios morfológicos em leucócitos de exemplar de kinguio (Carassius auratus auratus Linnaeus, 1758) com septicemia hemorrágica bacteriana: relato de caso / Morphologic disorders in leukocytes of goldfish sample (Carassius auratus auratus Linnaeus, 1758) with bacterial hemorrhagic septicemia: case report

O presente estudo teve por objetivo relatar um caso sobre as alterações morfológicas em leucócitos de kinguio comsepticemia hemorrágica bacteriana. Um exemplar foi atendido no Laboratório de Patologia de Organismos Aquáticos doCAUNESP, Unesp de Jaboticabal, apresentando apatia, natação errática, anorexia e discreta perda de equilíbrio, buscandoconstantemente a superfície da água. Através de análise visual da superfície corpórea, foram observadas áreas de hemorragiapetequial na base das nadadeiras peitoral, pélvica e caudal, além da órbita bucal, periocular e anal e efusão celomática. Naextensão sanguínea foram observadas a presença de monócitos ativados, hiperativados, e fagócitos mononuclearesrealizando eritrofagocitose e leucofagocitose, neutrófilos com basofilia citoplasmática e com vacuolização citoplasmática,além de imunócitos e leucócitos imaturos com anisocitose e anisocariose. As alterações morfológicas descritas no presenteestudo revelaram parte da patogenia e resposta orgânica de kinguio com septicemia hemorrágica bacteriana. Dessa forma,as análises qualitativas das células sanguíneas devem ser também utilizadas como ferramenta complementar aos estudosdo estado geral da saúde de peixes em cultivo.

The morphological changes in leukocytes of goldfish with bacterial hemorrhagic septicemia were reported. One sample was served at the Laboratory of Pathology of Aquatic Organisms of CAUNESP, Unesp in Jaboticabal. The fish showed lethargy, erratic swimming and without force, slight loss of balance, trying constantly to the water surface. In the body inspection, areas of petechial hemorrhage at the base of the pectoral fins, pelvic fins and caudal fin were observed, beyond the periocular and oral orbitand anal. Blood smears presented hiperactivated monocytes, performing erythrophagocytosis and leukophagocytosis, the cytoplasm of neutrophils presented basophilia and vacuolization, beyond immunocytes, immature leukocytes with anisocytosis and anisokaryosis. The morphological changes described in this study revealed part of the pathogenesis and organic response of Kinguio with bacterial hemorrhagic septicemia. Then, the qualitative analysis of blood cells should also be used as a complementary tool to study the general health status of fish farmed

Induction and recovery time for dourados Salminus brasiliensis (Cuvier, 1816) submitted to different concentrations of clove oil Eugenia sp - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.485 / Tempo de indução e de recuperação de dourados Salminus brasiliensis (Cuvier, 1816), submetidos a diferentes concentrações de óleo de cravo Eugenia sp. - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.485

The present study evaluated five different concentrations (20, 30, 40, 50 and 60 mg L-1) of clove oil as an anesthetic for dourado juveniles, using induction and recovery time to determine the ideal concentration. Significant difference (p 0.05) was observed among 20, 30, 40 and 60 mg L-1 levels of clove oil. However, 50 mg L-1 concentration did not show significant difference in comparison to 40 and 60 mg L-1. Regarding recovery time, the shortest time was verified in the concentration of 20 mg L-1. Clove oil is effective and safe as an anesthetic for dourado juveniles in levels between 40 and 60 mg L-1.

O presente estudo avaliou o óleo de cravo como anestésico para juvenis de dourado em cinco diferentes concentrações (20, 30, 40, 50 e 60 mg L-¹), utilizando como critério para determinação da concentração ideal os tempos de indução e de recuperação ao efeito do anestésico. Em relação aos tempos de indução, verificou-se diferença significativa (p 0,05) entre as concentrações de 20, 30, 40 e 60 mg L-¹ de óleo de cravo. No entanto, a concentração de 50 mg L-¹ não diferiu estatisticamente dos níveis de 40 e 60 mg L-¹. Quanto à recuperação, o menor tempo foi verificado para a concentração de 20 mg L-¹. O óleo de cravo é eficiente e seguro como anestésico para juvenis de dourado, quando utilizado entre 40 a 60 mg L-¹.

Investigação epidemiológica da brucelose bovina em um estrato do Estado de Mato Grosso do Sul / Epidemiological investigation of bovine brucellosis in an extract of Mato Grosso do Sul, Brazil

O objetivo deste estudo foi estimar a prevalência da brucelose bovina nos 22 municípios que compõem a região denominada Estrato 1 do Estado de Mato Grosso do Sul, e identificar os fatores de risco associados à infecção. A região amostrada constitui uma área de 70.214,1 km2, que representa 19,7% do Estado. O rebanho de região estudada é de, aproximadamente, 5,7 milhões de cabeças, correspondente a 23% do efetivo de 24,9 milhões de bovinos de Mato Grosso do Sul. Nas 210 propriedades amostradas, no período de dezembro de 2003 a março de 2004, foram colhidas 2.376 amostras de sangue de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses, submetidas a testes diagnósticos em série. A triagem, realizada por meio do teste do antígeno acidificado tamponado, foi seguida pelo teste confirmatório 2-mercaptoetanol. Na mesma ocasião da colheita das amostras, foi preenchido um questionário com informações de identificação, tipo de criação e práticas de manejo. Em animais, a prevalência real foi estimada em 5,6%, e em rebanhos, 37,3%. As variáveis que apresentaram associação, por meio da análise univariada odds ratio (OR) e intervalo de confiança (IC) de 95%, com a soropositividade à brucelose foram: o tipo de exploração corte (OR = 2,82, IC 95% = 1,49-5,34), a raça Zebu (OR = 2,62, IC 95% = 1,40-4,88) e o aborto (OR= 1,83, IC 95% = 1,01-3,33). Os resultados demonstram que, além da brucelose ser prevalente no estrato estudado em Mato Grosso do Sul, o controle da doença pode consistir na adoção de programa com especial atenção à exploração do tipo corte, à raça Zebu e à presença do aborto.

The study aimed to estimate the prevalence of bovine brucellosis in 22 counties which make up the region Extract 1 of the State of Mato Grosso do Sul, Brazil, in order to identify risk factors associated with the infection. The sample region encompasses an area of 70,214.1 km2 and represents 19.7% of the State. The region studied has about 5.7 million head of cattle, corresponding to 23% of the total of 24.9 million cattle in the State of Mato Grosso do Sul. On 210 farms, between December 2003 and March 2004, 2,376 blood samples were collected from cows, aged 24 months or older, for serial diagnostic tests. Screening through the buffered acidified antigen test was confirmed by the 2-mercaptoetanol test. On the occasion of sample collection a questionnaire with information related to identification, kind of cattle and management practices was filled out. In individual animals the real prevalence was estimated at 5.6%, and in the cattle herds at 37.3%. The variables, which presented association through odds ratio (OR), univariate analysis and 95% confidence interval (CI) with serum positivity for brucellosis, were: the exploration of beef cattle (OR = 2.82, 95% CI = 1.49-5.34), Zebu breed (OR = 2.62, 95% CI = 1.40-4.88) and abortion (OR = 1.83, 95% CI = 1.01-3.33). The results shown here demonstrate, despite the prevalence of brucellosis in the extract of Mato Grosso do Sul studied, that the control of the disease may depend on adoption of a program focusing upon the exploration of beef cattle, the Zebu breed and the occurrence of abortion.

Cinética do crescimento de Borrelia burgdorferi (Spirochaetaceae) em diferentes meios de cultivo / Cinetic growth of Borrelia burgdorferi (Spirochaetacease) in different culture media

Estudou-se a cinética de crescimento de Borrelia burgdorferi, por um período de 3 meses, utilizando os seguintes oito meios de cultivo : (1) BSK adicionado de soro de coelho, (2) BSK adicionado de soro de suíno, (3) BSK adicionado de soro de suíno + 5 fluorouracil, (4) PMR, (5) CTB, (6) Dubos, (7) Caldo Brucella e (8) BHI. Todos os meios foram preparados assepticamente e mantidos em tubos de ensaio com capacidade para 10 ml. Para cada meio, o inoculo foi padronizado para conter no início 10² espiroquetas para cada 0,1 ml de cultivo. O monitoramento do crescimento foi feito contando-se o total de espiroquetas em 0,1 ml do meio entre lâmina de microscopia e lamínula com dimen sões de 10x30mm, tendo sido utilizado microscópio de campo escuro. A contagem foi realizada durante 14 semanas, tendo sido diária nos primeiros 12 dias e semanal a partir desta data. Houve crescimento de B. burgdorferi em todos meios testados, com melhor performance para três deles: BSK adicionado de soro de coelho, BSK adicionado de soro de suíno + 5 fluorouracil e meio CTB. Observou-se crescimento de B. burgdorferi a partir da 4ª semana, atingindo o platô de crescimento entre a 8ª e 12ª semanas, quando começou a exaustão do meio de cultivo. Formas císticas de B. burgdorferi foram observadas em todos os meios testados.

Evaluation of antibodies production against Borrelia burgdorferi in cattle submitted to rBm86 protein Boophilus microplus tick immunization and associated challenges influence

Avaliou-se a produção de anticorpos da classe Ig-G anti Borrelia burgdorferi em bovinos imunizados com proteína recombinante Bm86 de Boophilus microplus, assim como a influência de imunizações e estresse associados por meio do teste ELISA indireto no período de um ano. Não houve interferência na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi pelos desafios utilizados isoladamente no presente estudo. O imunógeno rBm86 não causou oscilações significantes na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi capazes de interferir nos resultados sorológicos para Borreliose de Lyme em bovinos. O estudo demonstrou a possibilidade de alterações transitórias na produção de anticorpos após estímulos vacinais e de estresse associados, ressaltando a necessidade de estudos sorológicos em conjunto a dados epidemiológicos e de manejo.

Evaluation of antibodies production against Borrelia burgdorferi in cattle submitted to rBm86 protein Boophilus microplus tick immunization and associated challenges influence

IgG antibodies production against Borrelia burgdorferi in immunized cattle with rBm86 protein from Boophilus microplus was evaluated as well as the influence of the association between immunizations and stress through indirect ELISA test during one year. In the present study there was no influence of the isolated challenged used on the production of IgG antibodies against B. burgdorferi. The rBm86 immunogen did not cause significant oscillation in the production of IgG antibodies against B. burgdorferi capable to interfere in the serological results for Lyme Borreliosis in cattle. This study demonstrated the possibility of transitory changes in the production of antibodies after the association of vaccine stimuli and stress, emphasizing the necessity of serological studies combined with epidemiological and management data.

Avaliou-se a produção de anticorpos da classe Ig-G anti Borrelia burgdorferi em bovinos imunizados com proteína recombinante Bm86 de Boophilus microplus, assim como a influência de imunizações e estresse associados por meio do teste ELISA indireto no período de um ano. Não houve interferência na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi pelos desafios utilizados isoladamente no presente estudo. O imunógeno rBm86 não causou oscilações significantes na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi capazes de interferir nos resultados sorológicos para Borreliose de Lyme em bovinos. O estudo demonstrou a possibilidade de alterações transitórias na produção de anticorpos após estímulos vacinais e de estresse associados, ressaltando a necessidade de estudos sorológicos em conjunto a dados epidemiológicos e de manejo.

Evaluation of antibodies production against Borrelia burgdorferi in cattle submitted to rBm86 protein Boophilus microplus tick immunization and associated challenges influence

IgG antibodies production against Borrelia burgdorferi in immunized cattle with rBm86 protein from Boophilus microplus was evaluated as well as the influence of the association between immunizations and stress through indirect ELISA test during one year. In the present study there was no influence of the isolated challenged used on the production of IgG antibodies against B. burgdorferi. The rBm86 immunogen did not cause significant oscillation in the production of IgG antibodies against B. burgdorferi capable to interfere in the serological results for Lyme Borreliosis in cattle. This study demonstrated the possibility of transitory changes in the production of antibodies after the association of vaccine stimuli and stress, emphasizing the necessity of serological studies combined with epidemiological and management data.

Avaliou-se a produção de anticorpos da classe Ig-G anti Borrelia burgdorferi em bovinos imunizados com proteína recombinante Bm86 de Boophilus microplus, assim como a influência de imunizações e estresse associados por meio do teste ELISA indireto no período de um ano. Não houve interferência na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi pelos desafios utilizados isoladamente no presente estudo. O imunógeno rBm86 não causou oscilações significantes na produção de anticorpos IgG anti B. burgdorferi capazes de interferir nos resultados sorológicos para Borreliose de Lyme em bovinos. O estudo demonstrou a possibilidade de alterações transitórias na produção de anticorpos após estímulos vacinais e de estresse associados, ressaltando a necessidade de estudos sorológicos em conjunto a dados epidemiológicos e de manejo.

Borrelia sp. in naturally infected Didelphis aurita (Wied, 1826) (Marsupialia: Didelphidae)

Cinquenta e seis gambás (Didelphis aurita) foram capturados no campus da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica - Rio de Janeiro, com o intuito de se investigar a ocorrência de Borrelia sp. entre eles, associada ao estudo da espiroquetemia e de seus ectoparasitos. Amostras de sangue dos animais foram examinadas à microscopia de campo escuro e contraste de fase, além deste ter se destinado à obtençäo de esfregaços sanguíneos, corados pelo método de Giemsa. Näo houve relaçäo entre os resultados obtidos através dos exames diretos do sangue (13 gambás positivos para Borrelia sp.) e aqueles observados nos esfregaços sanguíneos (dois animais positivos), o que demonstra a baixa eficácia desta técnica. Estudos sobre a parasitemia de 37 animais mantidos em cativeiro, assim como as várias recapturas nas quais animais uma vez negativos mostraram-se positivos dias mais tarde, revelaram que os estudos hemoscópicos podem ser utilizados eficientemente como ferramentas de diagnóswtico. Ectoparasitas colhidos de nove animais foram classificados. Houve ocorrência de ninfas Amblyomma cajannense e adultos Ctenocephalides sp.

Borrelioses, agentes e vetores / Borrelioses, agents and vectors: a review

As borrelioses säo enfermidades infecciosas determinadas por espiroquetas do gênero Borrelia, agentes transmissíveis, principalmente, por carrapatos aos animais e/ou ao homem. Nesta revisäo säo apresentadas e discutidas as enfermidades determinadas por borrélias, bem como as características gerais das espiroquetas, os aspectos relacionados a transmissäo por artrópodes, as enfermidades nos animais domésticos e silvestres, quanto aos aspectos biológicos e patológicos, a doença de Lyme como principal zoonose do grupo, a associaçäo de borrélia com outros agentes hematozoários e os métodos diagnósticos e a epidemiologia comparativa entre dados obtidos no Brasil com os de outros países. Estas borrelioses possuem características patológicas, clínicas e epidemiológicas variadas de acordo à regiäo fisiográfica, devido à existência de distintas espécies, genoespécies e cepas; estes aspectos variam ainda em funçäo dos artrópodes vetores, da interaçäo vetor-patógeno e dos ecossistemas distintos.

Estudo sorológico comparativo da borreliose de lyme, brucelose e leptospirose em bovinos / Comparative serological study of Lyme Borreliosis, Brucelosis and Leptospirosis in cattle

Estudou-se a frequência de soros positivos de bovinos para borreliose de Lyme, brucelose e leptospirose, utilizando-se ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto para detecçäo de anticorpos anti-Borrelia burgdorferi lato sensu, soroaglutinaçäo rápida para Brucella abortus e microaglutinaçäo para Leptospira interrogans. Foram analisadas 376 amostras provenientes de animais de diferentes municípios do Estado do Rio de Janeiro, 100 amostras do monicípio de Bananal (Säo Paulo) e 37 amostras procedentes do município de Alegre (Espírito Santo). Nä houve relaçäo entre os resultados positivos para B. burgdorferi pelo teste ELISA, resultados positivos para L. interrogans pelo teste de soroaglutinaçäo microscópica e resultados positivos pata B. abortus pelo teste de soroaglutinaçäo rápida. A maior porcentagem de animais soropositivos para B. burgdorferi foi observada no grupo proveniente do município de Alegre (Espírito Santo), onde também foram identificados casos humanos com susperita clínica e sorologia positiva (ELISA e Western blotting). A percentagem de soropositivos caracteriza as regiöes estudadas como susperita para presença do agente da borreliose de Lyme.

Perfil da borreliose de Lyme no Brasil / Outline of Lyme borreliosis in Brazil

A partir de 1989, identificamos 25 pacientes com doenca de Lyme no Brasil, dos quais 15 no estagio agudo e dez na fase latente, que permitiram reforcar sua existencia, pelos seguintes motivos: 1) existencia de um perfil clinico, caracterizado por manifestacoes cutanea, gerais, articulares e raramente cardiacas; 2) demonstracao sorologica de anticorpos anti-Borrelia burgdorferi; 3) modificacao sorologica evolutiva dos casos agudos; 4) resposta boa aos antibioticos no estagio agudo e apenas satisfatoria dos casos latentes; 5) distribuicao geografica da casuistica permitiu o mapeamento das areas de risco; 6) identificacao de carrapatos Ixodideos; 7) visualizacao de microorganismos a microscopia de campo escuro, que lembram borrelias, em culturas de humanos, animais silvestres e carrapatos; 8) comprovacao da existencia de areas endemicas para borreliose de Lyme pela sorologia em caninos e bovinos